Диагностические тесты для обнаружения коронавирусной инфекции основаны на выявлении элементов вируса: РНК или белка. В обоих случаях выбирается уникальный элемент SARS-CoV-2, чтобы снизить риск перекрестной реакции со сходными вирусами. Вирион (внеклеточная форма вируса) SARS-CoV-2, как и другие коронавирусы, по своей форме чем-то напоминает мяч с шипами – то самое растиражированное изображение COVID-19. «Шипы» образованы шиповидным белком (S) и отвечают за взаимодействие вируса с клеткой хозяина и проникновение в нее. Шиповидные белки уникальны для каждого вида коронавируса. Оболочка вируса образована липидной мембраной, позаимствованной у клетки хозяина, с включением вирусных белков оболочки Е и М. Именно эти два белка участвуют в образовании вирионов и в поддержании их сферической формы. Внутри вириона находится его генетический материал, молекула РНК, упакованная вместе с белками нуклеокапсида (N). Вместе РНК и белки N образуют структуру, сходную с бусинами на нитке. Это позволяет свернуть длинную цепочку РНК в компактную форму. Генетический код разных видов коронавирусов во многом схож. Например, геномы вирусов SARS и SARS-CoV-2 похожи больше чем на 80%. Но и различий вполне достаточно, они и используются в дизайне диагностических тестов: для теста выбираются уникальные последовательности генома и белки, присущие определенному вирусу.
ПЦР-тест
Этот тест основан на обнаружении генетического материала вируса в биологическом образце методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Метод использует праймеры – короткие цепочки нуклеиновых кислот, специально подобранные для распознавания уникальных мишеней-последовательностей в геноме вируса, и полимеразу – фермент, который создает из праймеров, распознавших участки вируса, более длинные цепочки, копию вирусного гена. Праймеры и полимераза работают вместе только в том случае, если в образце есть генетический материал вируса.
В случае коронавируса в тест-системах используются разные гены по выбору производителя. В некоторых тестах может быть задействовано более одной мишени, что повышает чувствительность и специфичность.
Чаще всего в качестве мишеней используются гены нуклеопротеина (N), шиповидного белка (S) или РНК-зависимой РНК полимеразы (RdRP). Уникальные последовательности праймеров для любой из тест-систем были выбраны на основе анализа сходных коронавирусов и являются уникальными для SARS-CoV-2.
Это позволяет исключить инфекцию другим коронавирусом как причину положительного теста на ковид. Материал для теста получают при помощи мазка из носоглотки или носа, иногда бронхов.
Слюна тоже может быть использована для анализа, но вероятность ложно-отрицательного теста в таком случае выше из-за более низкой концентрации вируса. Вероятность ложноположительного ПЦР теста достаточно низкая и чаще всего связана сo случайным попаданием вируса в образец пациента при заборе материала на анализ.
Чувствительность теста в среднем — около 95%, специфичность — около 98%. Чувствительность ПЦР-теста в реальных условиях может быть ниже в определенных тест-системах, а также при низкой вирусной нагрузке, которая зависит как от дня от начала заболевания, так и от индивидуальной реакции пациента на вирусную инфекцию.
Чувствительность экспресс-тестов ниже стандартных лабораторных тестов. В связи с высокой чувствительностью теста генетический материал вируса может быть обнаружен даже спустя несколько недель после острой инфекции.
В большинстве случаев выздоровевшие пациенты не заразны после двух недель от начала симптомов, несмотря на положительный тест. Исключение представляют собой пациенты с сильной иммуносупрессией, как, например, при химиотерапии лимфомы.
У таких людей вирус может оставаться активным и способным к заражению продолжительное время.
Главный внештатный пульмонолог Минздрава России Сергей Авдеев заявлял, что примерно в 30-40% случаев ПЦР-тест на коронавирус может дать ложноотрицательный результат. Но к качеству тестов в Минздраве претензий нет — ошибки там связывают с тем, как осуществляется забор проб.
Тесты на антигены коронавируса
Тесты на антигены вируса основаны на выявлении частиц вируса в исследуемом материале. Осуществляется это при помощи антител, которые распознают белки вируса – антигены. Большинство тестов на данный момент построено на обнаружении шиповидного белка вируса SARS-CoV-2.
Тесты на антиген вируса требуют меньше времени, могут быть сделаны вне лаборатории и стоят дешевле, чем ПЦР-тесты. Но при этом их чувствительность ниже, около 56%, хотя специфичность остается высокой и достигает 98%. Тест на антиген коронавируса может быть сделан по анализу из носа или носоглотки, а также по анализу слюны.
Поскольку тест дает быстрый ответ при достаточно низкой чувствительности, его часто комбинируют с ПЦР-тестом, что снижает частоту ложноотрицательного результата у пациента.
Использование диагностических тестов
ПЦР-тест и антигенный тест чаще всего используются для диагностики острой коронавирусной инфекции. Положительный, как и отрицательный результат теста должны интерпретироваться исходя как из истории болезни, так и из клинической картины заболевания.
Если у пациента есть симптомы COVID-19 и он контактировал с больным с подтвержденной коронавирусной инфекцией, то отрицательный тест не означает отсутствие у него коронавирусной инфекции. Диагностические тесты (ПЦР и антигенный) также используются для скрининга бессимптомных пациентов, чтобы отследить цепочки заражения и последующей изоляции.
В некоторых странах этот тест требуется перед операциями и процедурами, а также химиотерапией.
Серологические тесты — на антитела
Серологические тесты определяют наличие в крови пациента антител — иммуноглобулинов, выработанных в ответ на инфекцию. Насчитывается пять классов иммуноглобулинов. Из них три класса, IgM, IgG и IgА являются основными в иммунной защите организма.
Антитела – это сложные белки с несколькими функциями. Они способны не только распознавать специфические патогены, но и активировать защитные механизмы организма, позволяющие нейтрализовать и уничтожить вирусы и бактерии. Антитела – часть приобретенного иммунитета, поэтому их наличие в крови сигнализирует о встрече с определенным патогеном и подтверждает прошлую инфекцию.
При бактериальной инфекции развитие специфического иммунного ответа достаточно предсказуемо. Первыми на инфекцию реагируют клетки неспецифического иммунитета – нейтрофилы, макрофаги и моноциты. Их задача – найти и обезвредить врага, что они могут сделать и без наводки антител.
Дальше к делу подключается специфический иммунитет, способный распознать чужака и более эффективно его нейтрализовать, а также не дать ему вызвать инфекцию при повторном попадании в организм. За специфический иммунитет отвечают лимфоциты: В- и Т-клетки.
Координация работы специфического иммунного ответа сложна и в определенной степени хаотична: организм определяет нужные антитела и клетки путем подбора из множества вариантов в процессе взаимодействия нескольких видов клеток.
Те самые иммуноглобулины, которые способны защитить организм в будущем – дело совершенно случайной, но удачной мутации.
В большинстве клеток организма мутация, или изменение генома, не приветствуется. Но лимфоциты – исключение из этого правила. Определенные участки генома этих клеток активно мутируют, чтобы создать целую картотеку рецепторов для возможных врагов. Каждый из этих рецепторов может распознать один эпитоп – участок антигена.
У В-клеток в качестве рецептора используется иммуноглобулины М и D, прикрепленные к поверхности клетки. У Т-клеток ту же роль играет белок сходной конструкции с добавочной функцией распознавания хозяина. При встрече с подходящим антигеном В-клетка способна не только распознать его, но и начать запуск антител.
Т-клетки необходимы для активации В-клеток, а также для распознавания клеток организма, зараженных бактериями или вирусами.
Производство иммуноглобулинов обычно начинается с иммуноглобулина М, а потом переходит к иммуноглобулину класса G.
Переход сопровождается дальнейшей подгонкой иммуноглобулина к эпитопу, в результате чего отбираются В-клетки с иммуноглобулинами, еще более точно распознающими эпитоп и более тесно связывающие его. Способность иммуноглобулина связывать антиген называется аффинностью.
С течением инфекции и при повторной встрече с бактерией или вирусом аффинность увеличивается. Таким образом, в самом начале инфекции обычно обнаруживаются антитела класса М, а со временем их вытесняют антитела класса G.
Однако в случае коронавируса ситуация далека от классической. Антитела классов М и G к нескольким эпитопам вируса (нуклеокапсид и шиповидный белок) в отдельных случаях коронавирусной инфекции можно обнаружить уже на четвертый день от начала инфекции.
Антитела IgG и IgM иногда можно обнаружить уже на четвертый день от начала инфекции
В то же время чувствительность серологических тестов в первые две недели от начала симптомов остается крайне низкой, всего около 30%. Чувствительность значительно повышается после второй недели заболевания и достигает 72%.
Антитела класса М могут быть обнаружены в крови и спустя несколько недель после острой инфекции, поэтомы не являются индикатором риска заражения.
Диагностика осложняется выбором антигенов для анализа: в некоторых тест-системах для определения антител используется нуклеокапсид вируса, в других – шиповидный белок, в третьих – часть шиповидного белка, отвечающая за взаимодействие вируса с клеткой – рецептор-связывающих домен.
Чувствительность теста можно повысить, если использовать сразу несколько антигенов или же включить в тест IgG и IgМ.
Во многих странах на рынке уже появились тест-системы самых разных компаний и продолжают появляться новые, что затрудняет интерпретацию серологических тестов без информации о конкретной тест-системе.
Уровень антител может определяться как качественно (антитела обнаружены/отсутствуют), так и количественно, с определением уровня или титра антител по шкале, выбранной производителем.
Использование серологических тестов
Серологические тесты не рекомендуется использовать для диагностики острой коронавирусной инфекции, поскольку их чувствительность в первую неделю заболевания слишком низкая.
В то же время они могут служить подтверждением недавней коронавирусной инфекции при соответствующей клинической картине и отрицательном ПЦР или антиген-тесте.
Делать такой анализ стоит не раньше, чем по прошествии двух недель от начала симптомов, поскольку до этого уровень антител может быть слишком низким для достоверного результата.
Тест на антитела надо сдавать не раньше, чем через две недели после появления симптомов
Серологические тесты должны интерпретироваться с крайней осторожностью в целях определения защитного иммунитета к коронавирусу SARS-CoV-2.
Далеко не все тест-системы могут выявить нейтрализующие антитела, то есть антитела, предотвращающие проникновение вируса в клетку. Поэтому стоит уточнить, что именно может определить тот или иной тест перед тем, как сдавать анализ. Иммунный ответ на коронавирусную инфекцию всё ещё недостаточно изучен.
На данный момент неизвестно, дают ли антитела долгосрочную защиту, а также какой уровень антител необходим для этого: исследования показали как длительную циркуляцию антител в крови, так и их достаточно быстрое исчезновение.
О том, что нейтрализующие антитела позволяют избежать инфекции, можно судить по публикациям о вспышках коронавирусной инфекции, в которых не заболевшими были люди с нейтрализующими антителами.
Повторные случаи инфекции были выявлены, но пока публикаций об этом недостаточно, чтобы понять факторы риска повторного заражения, в том числе, чтобы определить, связано ли оно с падением титра антител.
Серологический анализ, доступный в большинстве коммерческих лабораторий, не позволяет определить способность нейтрализующих антител защитить от любого штамма коронавируса.
Поэтому серологические тесты на данный момент не дают достоверного представления ни о степени защиты от повторного заражения, ни о времени, в течение которого человек защищен от коронавирусной инфекции, ни о том, что такая защита будет эффективна от другого штамма вируса.
Тесты для диагностики коронавирусной инфекции чаще всего используются для подтверждения клинического диагноза. Результат теста стоит интерпретировать, исходя из вероятности диагноза еще до проведения теста.
Эта вероятность конкретно для коронавирусной инфекции определяется клинической картиной, историей инфекционных контактов, а также эпидемиологической обстановкой – заболеваемостью среди населения.
Таким образом, отрицательный ПЦР-тест у пациента с кашлем, высокой температурой и одышкой, а также недавним близким контактом с человеком с уже подтвержденной коронавирусной инфекцией, не может полностью исключить COVID-19. В то же время тест на скрининге бессимптомного пациента без известных ему заразных контактов может оказаться ложноположительным.
B оптимальных условиях консультация специалиста поможет определить стратегию тестирования и интерпретацию диагностических тестов c учетом истории инфекционных контактов, симптомов и хода заболевания.
подпишитесь на регулярные пожертвования
О видах исследований на новую коронавирусную инфекцию covid-19
Сегодня наиболее актуальной задачей общественного здравоохранения является обеспечение безопасности населения Российской Федерации. С этой целью проводится массовое тестирование населения на коронавирусную инфекцию.
Оно позволяет выявить как заболевших на ранней стадии, так и бессимптомных носителей. В настоящее время существует несколько видов исследований, у каждого из которых свои цели и назначения.
Все исследования можно разделить на две большие группы: прямые – обнаружение возбудителя и непрямые – обнаружение иммунного ответа человека на контакт с возбудителем.
Прямые методы.
1. Молекулярная диагностика — обнаружение РНК вируса
Этот тест предназначен для диагностики активной коронавирусной инфекции и проводится тем, у кого есть симптомы респираторного заболевания или тем, кто имел контакты с возможным источником инфекции. Для этого берется мазок из носа и ротоглотки и методом ПЦР выявляется наличие или отсутствие генетического материала вируса (РНК коронавируса) в биологическом материале человека.
Отсутствие генетического материала возбудителя означает, что человек не инфицирован на момент взятия анализа. Для подтверждения или исключения наличия инфекции тест выполняется повторно через 10 дней после первичного взятия мазка.
Также повторное тестирование необходимо при выписке больных COVID-19 из стационара – для этого необходимо получение двух отрицательных результатов с промежутком не менее суток.
Применяемые сегодня тест-системы отличаются высокой точностью. Однако возможны и отрицательные ответы (даже при наличии симптомов, схожих с COVID-19).
Причины этому могут быть следующие: небольшая вирусная нагрузка (малое количество вируса в биоматериале), поздние стадии заболевания (вирус уже «спустился» в лёгкие из верхних дыхательных путей), человеческий фактор (нарушения при заборе биологического материала).
2. Анализ на вирусные антигены (экспресс-тесты)
Вирусные антигены – это белки, входящие в состав вируса, которые распознаются иммунной системой. Анализ на вирусные антигены – это еще один тест для диагностики коронавирусной инфекции, в том числе у тех, кто контактировал с ней. Отсутствие вирусных антигенов означает и отсутствие у человека инфекции.
Но, как и во всех остальных тестах, результат актуален лишь на момент сдачи анализа и не гарантирует, что человек не мог заразиться позже, уже после проведения исследования. Тест на антигены достаточно прост, может быть проведён непосредственно на приёме у врача.
При этом существенным ограничением его применения является невысокая аналитическая чувствительность.
Непрямые методы – обнаружение антител против коронавируса
1. Анализ на антитела (IgM и IgG)
Для этого исследования используется капиллярная или венозная кровь. IgM и IgG – это иммунные клетки, которые вырабатываются в организме человека в результате его контакта с вирусом.
IgM вырабатываются в самом начале заболевания, обычно они появляются на 3-5 день после появления первых симптомов и свидетельствуют о продолжающемся остром заболевании — текущей инфекции.
IgG появляются, когда человек преодолел инфекцию, обычно на 10-14 день от начала заболевания и остаются достаточно долго после болезни. Принято считать, что их наличие говорит о перенесенном заболевании и о формирующемся иммунитете.
Насколько долго антитела класса IgG будут сохраняться в крови и защищать от повторного инфицирования пока неизвестно – мы знакомы с вирусом менее года и пока можем только предполагать, что иммунитет сохранится, минимум, на полгода.
Тест на антитела класса IgG позволяет оценить коллективный иммунитет населения нашей страны к COVID-19. Пройти его может любой, кто хочет как можно скорее узнать свой иммунный статус по отношению к новой коронавирусной инфекции и при этом не имеет симптомов заболевания и контактов с инфекцией.
Полученные результаты могут служить не только для определения антительного иммунного ответа у конкретного человека, но и для оценки количества переболевших в разных группах населения.
Некоторые тесты на антитела методом иммуноферментного анализа крови (ИФА) еще и определяет титр – количество выявленных антител.
Для определения антител также могут использоваться экспресс-тесты – они выявляют наличие или отсутствие антител. Экспресс-тест на антитела прост в исполнении, может использоваться на приеме у врача, результат может быть получен через несколько минут, но обладает меньшей чувствительностью, чем тесты, выполненные методом ИФА.
Методы диагностики ЗППП
Методы диагностики инфекционных заболеваний делятся на две категории: выявление непосредственно самих возбудителей инфекций (бактерии и вирусы) и выявление антител к ним. К первому типу относятся микробиологические исследования и молекулярная диагностика, ко второму — серологические и иммунохимические исследования.
Микробиологические исследования
Мазок (бактериоскопический метод) — самый распространенный метод лабораторной диагностики.
При бактериоскопическом методе анализ выполняется с помощью светового микроскопа. Исследуемый материал вносят в каплю физраствора, тщательно размешивают и распределяют по стеклу. Должно наступить хорошее окрашивание частей клеток и бактерий в разные цвета, чтобы оценить состав выделений из уретры, влагалища и шейки матки.
Анализ соскоба из уретры или влагалища в гинекологии позволяет определить: — количество лейкоцитов (их повышение говорит об инфекции, но у здоровых женщин небольшое число лейкоцитов присутствует во флоре); — количество эритроцитов (основной показатель воспалительного процесса при повышенном количестве); -состав флоры (у женщин он зависит от менструального цикла, но активность клеток говорит о нарушении микрофлоры); — наличие трихомонады, гонококков, грибка – основная цель для выявления возбудителя инфекций; — наличие лактобацилл (их отсутствие говорит о нарушенной микрофлоре). Также мазок определяет степень чистоты влагалища женщины: 1 и 2 степень – характерна для здоровой флоры, а 3 и 4 – выявляет кольпит, воспаление.
Преимущества данного метода состоят в простоте, доступности и быстроте получения результатов (30 — 60 мин и менее). Однако чувствительность данного метода ограничена (около 105 бактерий в 1 мл).
Практически не определяются в урогенитальном мазке вирусы, хламидии, микоплазмы и уреаплазмы, и одних только результатов мазка часто бывает недостаточно для постановки диагноза.
Для диагностики этих инфекций рекомендуется использовать методы ПЦР-диагностики и ИФА-исследований. Результаты мазка обычно можно использовать как ориентировочные.
Перед сдачей мазка лучше воздержаться от мочеиспускания.
Бактериологический метод (бакпосев)
Бакпосев – метод диагностики ЗППП путем выращивания микробов в благоприятной для этого среде. Он является золотым стандартом в определении инфекций, поскольку выявляет не только вирус, но и его активность.
Преимуществом данного метода является возможность не только выявить бактерию, но и возможность получить антибиотикограмму, на основе которой врач назначает точное лечение.
Наиболее часто бакпосев используют для диагностики уреаплазмоза, микопламзоза, трихомониаза, хламидиоза, различных форм кандидоза.
Правила сдачи анализа на бакпосев:
- за сутки не спринцеваться, не пользоваться вагинальными свечами;
- за сутки до анализа воздержаться от половых контактов;
- за неделю прекратить прием антибиотиков;
- не опорожнять мочевой пузырь за 1,5-2 часа.
Молекулярная диагностика
ПЦР-диагностика, или полимеразная цепная реакция, направлена на определение специфической нуклеотидной последовательности участка ДНК возбудителя инфекции внутри клетки, чего нельзя добиться при мазке или бакпосеве.
ПЦР-анализ часто используется для выявления: хламидиоза, уреаплазмоза, микоплазмоза, гениального герпеса, гонореи, трихомониаза. ДНК-диагностика незаменима для выявления вирусных гепатитов и ВИЧ-инфекции.
Данный метод способен выявить возбудителя даже на стадии инкубационного периода, однако он не дает представления об активности вируса, как это дает ИФА.
Кроме того, ПЦР может не выявить генитальный герпес и цитомегаловирус в соскобе с влагалища, если вирус находится в «спячке» — для выявления данных инфекций рекомендуется использовать метод иммуноферментного анализа. Правила сдачи материала на ПЦР-диагностику такие же, как при бакпосеве.
ПЦР — наиболее точный и современный метод диагностики. Проведенная в нескольких зарубежных исследовательских центрах суммированная оценка чувствительности различных методов диагностики показала, что «быстрые» или экспресс-тесты имеют чувствительность 40-60%, ИФА — 50-70%, прямая иммунофлюоресценция (ПИФ) — 55-75%, культуральное исследование — 60-80%, а ПЦР от 90 до 100%.
Серологические и иммунохимические исследования
ПИФ предусматривает прямое выявление антигенов хламидий.
ПИФ-метод является важнейшим скриниговым методом диагностики урогенитального хламидиоза.
Показания к назначению анализа:
- Острая фаза заболевания.
- Хроническая фаза заболевания.
- Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
- Беременность при отягощённом акушерском анамнезе.
- Бесплодие неясного генеза.
Подготовка к исследованию: У женщин взятие биологического материала лучше всего проводить не ранее чем через 14 дней после менструации. Перед взятием материала пациентам рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов.
Материал для исследования: соскоб из уретры или цервикального канала, осадок мочи, секрет предстательной железы.
Недостатком данного метода является частота ложноположительных результатов на хламидиоз. При использовании метода прямой иммунофлюоресценции ложноположительный диагноз урогенитального хламидиоза ставится у 36% пациентов. В зарубежной практике установленный по ПИФ диагноз принято подтверждать с помощью культурального исследования.
ИФА
Иммуноферментный анализ нацелен на выявление антител в крови. Соответственно, чем больше титр, тем больше антител к тому или иному инфекционному заболеванию. IgG – антитела говорят о перенесенном в прошлом инфекционном заболевании, а IgМ – антитела говорят о наличии острого инфекционного процесса. ИФА позволяет диагностировать:
- вирусные инфекций: гепатиты, ВИЧ-инфекции, вирус герпеса, краснухи, цитомегаловирус;
- бактериальные инфекции: туберкулез, боррелиоз, сифилис;
- иные болезни: лямблиоз и токсоплазмоз.
Такой анализ крови необходим, чтобы определить стадию заболевания, оценить эффективность лечения, получить информацию о перенесенном ранее заболевании.
Серологические исследования
Антитела IgG к Хеликобактер пилори (Аnti-Helicobacter pylori IgG)
450 руб.
Антитела IgM к Токсоплазме гонди (Аnti-Toxoplasma gondii IgМ)
450 руб.
Антитела IgG к антигенам аскарид
450 руб.
Антитела IgА к Хеликобактер пилори (Аnti-Helicobacter pylori IgА)
450 руб.
Антитела IgG к Токсоплазме гонди (Аnti-Toxoplasma gondii IgG)
450 руб.
Антитела IgG к антигенам эхинококка (Аnti-Echinococcus granulosus IgG)
450 руб.
Антитела суммарные к белку CagA Хеликобактер пилори (Аnti-Helicobacter pylori CagA, сумм)
550 руб.
Определение авидности антител IgG к Токсоплазме гонди (Toxoplasma gondii-AV)
800 руб.
Антитела IgG к антигенам описторхисов (Аnti-Opisthorchis IgG)
450 руб.
Антитела IgА к иерсинеозу (Аnti-Yersinia enterocolitica IgA)
700 руб.
Антитела IgG к антигенам токсокар (Аnti-Toxocara canis IgG)
450 руб.
Антитела IgG к иерсинеозу (Аnti-Yersinia enterocolitica IgG)
700 руб.
Антитела IgG к антигенам трихинелл (Аnti-Trichinella spiralis IgG)
450 руб.
Антитела IgM к Хламидии пневмонии (Аnti-Chlamydia рneumoniae IgM)
450 руб.
Антитела IgG к Трихомонас вагиналис (Аnti-Trichomonas vaginalis IgG)
450 руб.
Антитела IgG к Хламидии пневмонии (Аnti-Chlamydia pneumoniae IgG)
500 руб.
Антитела IgG к возбудителю амебиаза (Anti-Entamoeba histolytica IgG)
700 руб.
Псевдотуберкулез
450 руб.
Антитела IgА к Хламидии пневмонии (Аnti-Chlamydia pneumoniae IgА)
500 руб.
Антитела IgA к Хламидии трахоматис (Аnti-Chlamydia trachomatis IgA)
450 руб.
Антитела IgM к Хламидии трахоматис (Аnti-Chlamydia trachomatis IgМ)
450 руб.
Шигеллез. Антитела к шигеллам Зонне (anti-Shigella sonnei) (РПГА)
450 руб.
Антитела IgG к Хламидии трахоматис (Аnti-Chlamydia trachomatis IgG)
450 руб.
Шигеллез. Антитела к шигеллам Флекснера (Аnti-Shigella flexneri 1-V, V1) (РПГА)
450 руб.
Антитела IgM к Микоплазме пневмония (Аnti-Mycoplasma pneumoniae IgМ)
450 руб.
Антитела IgА к Микоплазме пневмония (Аnti-Mycoplasma pneumoniae IgА)
500 руб.
Антитела IgG к Микоплазме пневмония (Аnti-Mycoplasma pneumoniae IgG)
450 руб.
Антитела IgG к Микоплазме хоминис (Аnti-Mycoplasma hominis IgG)
450 руб.
Антитела IgМ к Микоплазме хоминис (Аnti-Mycoplasma hominis IgМ)
500 руб.
Антитела IgA к Микоплазме хоминис (Аnti-Mycoplasma hominis IgA)
450 руб.
Антитела IgG к Уреаплазме уреалетикум (Аnti-Ureaplasma urealyticum IgG)
450 руб.
Антитела IgА к Уреаплазме уреалетикум (Аnti-Ureaplasma urealyticum IgA)
450 руб.
Антитела IgМ к Уреаплазме уреалетикум (Аnti-Ureaplasma urealyticum IgМ)
500 руб.
Антитела IgG к возбудителю бруцеллеза (Anti-Brucella spp. IgG)
600 руб.
Антитела IgM к возбудителю бруцеллеза (Anti-Brucella spp. IgM)
700 руб.
Антитела IgG к возбудителю боррелиоза (Anti-Borellia Burgdorferi IgG)
700 руб.
Антитела IgМ к возбудителю боррелиоза (Anti-Borellia Burgdorferi IgМ)
700 руб.
Антитела суммарные к туберкуллезу (Anti-Micobacterium tuberculosis ), сумм
700 руб.
Антитела IgА к возбудителю коклюша (Аnti-Bordetella pertussis IgА)
700 руб.
Антитела IgМ к возбудителю коклюша (Аnti-Bordetella pertussis IgМ)
700 руб.
Антитела IgG к возбудителю коклюша (Аnti-Bordetella pertussis IgG)
700 руб.
Антитела IgG к коклюшному токсину (Аnti-Bordetella pertussis toxin, IgG)
800 руб.
Цитомегаловирус / вирус Эпштейна-Барр / вирус герпеса 6 типа, кач. определение ДНК
750 руб.
Вирус Эпштейна-Барр (Epstein-Barr Virus, EBV), кол. определение ДНК
600 руб.
Вирус Эпштейна-Барр (Epstein-Barr Virus, EBV), кач. определение ДНК
300 руб.
Вирус Варицелла-Зостер (Varicella-Zoster Virus, VZV), кач. определение ДНК
300 руб.
Вирус герпеса 6 типа (Human Herpes Virus 6, HHV), кол. определение ДНК
600 руб.
Цитомегаловирус (Cytomegalovirus, CMV), кач. определение ДНК
400 руб.
Цитомегаловирус (Cytomegalovirus, CMV), кол. определение ДНК
600 руб.
Вирус простого герпеса 1 и 2 типа (Herpes Simplex Virus, HSV), кач. определение ДНК
300 руб.
Определение генотипа вируса гепатита С
1200 руб.
Типирование вируса простого герпеса (Herpes Simplex Virus, HSV) 1 и 2 типа) кач. определение ДНК
300 руб.
Цитомегаловирус /вирус Эпштейна-Барр /вирус герпеса 6 типа (Cytomegalovirus/Epstein-Barr virus/Human Herpes Virus 6), кач. определение ДНК
750 руб.
Вирус Варицелла-Зостер (Varicella-Zoster Virus, VZV), кач. определение ДНК
300 руб.
Вирус герпеса человека 8 типа (Human Herpes Virus 8, HHV), кач. определение ДНК
450 руб.
Вирус герпеса 6 типа (Human Herpes Virus 6, HHV), кач. определение ДНК
450 руб.
Цитомегаловирус (Cytomegalovirus), кач. определение ДНК
400 руб.
Вирус Эпштейна-Барр (Epstein-Barr Virus, EBV), кач. определение ДНК
300 руб.
Вирус простого герпеса (Herpes Simplex Virus, HSV) 1 и 2 типа, кач. определение ДНК
300 руб.
Дифференциация ДНК возбудителей коклюша (Bordetella pertusis), паракоклюша (Bordetella parapertusis), бронхисептикоза (Bordetella bronchiseptica), кач. определение ДНК
600 руб.
Хеликобактер (Helicobacter pylori), кач. определение ДНК
450 руб.
Посев на возбудителей кишечной инфекции (сальмонеллы, шигеллы, энтеропатогенные эшерихии) без определения чувствительности к антибиотикам
1300 руб.
Посев на возбудителей кишечной инфекции (сальмонеллы, шигеллы, энтеропатогенные эшерихии) с определением чувствительности к антибиотикам
1300 руб.
Посев на коклюш (Bordetella pertussis)
1300 руб.
Посев на дифтерию (Corynebacterium diphtheriae)
1500 руб.
Антитела суммарные к возбудителю сифилиса (Аnti-Treponema pallidum), суммарные методом ИФА
450 руб.
Антитела суммарные к возбудителю сифилиса (Аnti-Treponema pallidum), суммарные методом РПГА
300 руб.
Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном (Syphilis RPR)
250 руб.
Антитела IgM к возбудителю сифилиса (anti-Treponema pallidum IgM), методом ИФА
600 руб.
Антитела IgG к возбудителю сифилиса (anti-Treponema pallidum IgG), методом ИФА
600 руб.
Антитела к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типов (Аnti-HIV 1, 2)
350 руб.
Антитела к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типов (Аnti-HIV 1, 2) с оформлением сертификата об отсутствии ВИЧ-инфекции
800 руб.
Антитела к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типов + антиген р24 (Аnti-HIV 1, 2 + р24)
600 руб.
Поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg)
300 руб.
Антитела суммарные к поверхностному антигену S вируса гепатита В (Аnti–HВsAg сумм)
600 руб.
Антитела IgM к сердцевине вируса гепатита В (аnti-HBcor IgM)
450 руб.
Антитела суммарные к сердцевине вируса гепатита В (Аnti-HВcor, сумм)
450 руб.
Антиген е вируса гепатита В (HВeAg)
500 руб.
Антитела суммарные к антигену е вируса гепатита В (Аnti-HВeAg, сумм)
500 руб.
Антитела суммарные к вирусу гепатита С (Аnti -HCV, сумм)
300 руб.
Антитела IgМ к вирусу гепатита С (Аnti-HCV IgМ)
300 руб.
Антитела IgM к вирусу гепатита D (Аnti-HDV IgM)
450 руб.
Антитела суммарные к вирусу гепатита D (Аnti-HDV, сумм)
450 руб.
Антитела IgM к вирусу гепатита Е (anti-HEV IgМ)
600 руб.
Антитела IgG к вирусу гепатита Е (аnti-HEV IgG)
600 руб.
Антитела IgM к цитомегаловирусу (Аnti-CMV IgM)
450 руб.
Определение авидности антител IgG к цитомегаловирусу (CMV-AV)
700 руб.
Антитела IgG к вирусу простого герпеса 1 и 2 -го типа (Аnti-HSV-1, 2 IgG)
450 руб.
Антитела IgМ к вирусу простого герпеса 1-го типа (Аnti-HSV-1 IgМ)
450 руб.
Антитела Ig M вирусу простого герпеса 1 типа (anti-HSV 1 Ig M)
450 руб.
Антитела IgG к вирусу простого герпеса 1-го типа (Аnti-HSV-1 IgG)
500 руб.
Антитела IgМ к вирусу простого герпеса 2-го типа (Аnti-HSV-2 IgМ)
450 руб.
Антитела IgG к вирусу простого герпеса 2-го типа (Аnti-HSV-2 IgG)
450 руб.
Антитела IgG к вирусу герпеса 6-го типа (Аnti-HHV-6 IgG)
600 руб.
Антитела IgG к вирусу герпеса 8-го типа (Аnti-HHV-8 IgG)
600 руб.
Антитела IgM к вирусу краснухи (Аnti-Rubella IgM)
450 руб.
Антитела IgG к вирусу краснухи (Аnti-Rubella IgG)
430 руб.
Антитела IgG к вирусу кори (Аnti-Measles virus IgG)
450 руб.
Антитела IgG к ядерному антигену вируса Эпштейна-Барр (Аnti-EBV-NA IgG)
450 руб.
Антитела IgG к капсидному белку вируса Эпштейна-Барр (Аnti-EBV-VCA IgG)
500 руб.
Антитела IgG к раннему антигену вируса Эпштейна-Барр (Аnti-EBV-EA IgG)
600 руб.
Антитела IgM к капсидному белку вируса Эпштейна-Барр (Аnti-EBV-VCA IgM)
450 руб.
Антитела IgM к вирусу Варицелла-Зостер (Аnti-VZV IgМ)
450 руб.
Антитела IgG к вирусу Варицелла-Зостер (Аnti-VZV IgG)
450 руб.
Антитела IgG к вирусу клещевого энцефалита (Аnti-TBEV IgG)
700 руб.
Антитела IgM к вирусу клещевого энцефалита (Аnti-TBEV IgМ)
700 руб.
Антитела IgM к аденовирусу (Аnti-Adenovirus IgМ)
700 руб.
Антитела IgG к аденовирусу (Аnti-Adenovirus IgG)
700 руб.
Антитела IgА к аденовирусу (Аnti-Adenovirus IgА)
700 руб.
Антитела IgG к респираторно-синцитиальному вирусу (Аnti-RSV IgG)
700 руб.
Антитела IgM к респираторно-синцитиальному вирусу (Аnti-RSV IgM)
700 руб.
Забор крови из вены позволит не только определить наличие инфекции в организме, но и поставить точный диагноз.
Серологическое исследование назначают при подозрении на венерическое заболевание, в том числе и на ВИЧ. Кроме того, серологический анализ может выявить паразитов в организме.
Данный анализ позволяет выявить возбудителя инфекции, а также является основанием для выбора тактики лечения.
Для анализа берется биологический материал человека:
Забор крови проводится натощак, как из вены, так и из пальца. Накануне анализа рекомендуется диета, ограничение физических нагрузок. К сдаче кала или слюны особой подготовки не требуется. Показания к анализу
Серологические анализы выявляют возбудителей следующих заболеваний:
- цитомегаловирус
- ВИЧ
- герпес и другие венерические инфекции
- токсоплазмоз
- дифтерия
- бруцеллез
- лишай
- вирус Эпштейн-Барра и др
Серологические исследования в клиниках сети «Здоровье»
Приглашаем вас сдать все необходимые анализы в наши клиники.
Мы гарантируем:
- стерильные комфортные условия
- незамедлительную доставку материала в лабораторию
- точность результатов
Всего несколько граммов крови из вены прояснят картину состояния организма, определят, есть ли у вас, например, герпес, гельминты, многие другие заболевания. Опытные врачи «Здоровья» проанализируют полученные результаты и назначат эффективное лечение заболевания.
Актуальные методы диагностики COVID-19
Микробиологическая диагностика
Метод амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) или ОТ-ПЦР в диагностике текущей инфекции
Диагноз COVID-19 устанавливается путем выявления РНК SARS-CoV-2 при помощи МАНК или ОТ-ПЦР. Различные виды анализов с использованием ОТ-ПЦР применяются во всем мире.
В исследованиях также амплифицируются и обнаруживаются различные участки генома SARS-CoV-2.
К обычным генным мишеням относятся нуклеокапсид (N), оболочка (Е), шипы (S) и РНК-зависимая РНК-полимераза, а также различные области в первой открытой рамке считывания.
- Сбор образцов Образцы из верхних дыхательных путей являются основным типом проб для проведения теста ОТ-ПЦР на SARS-CoV-2. CDC рекомендует производить забор одного из перечисленных образцов:
- образец мазка из носоглотки, взятый медицинским работником;
- образец мазка из ротоглотки, взятый медицинским работником;
- образец мазка из передней части носа, взятый медицинским работником или самим пациентом на месте или дома;
- назальные или носоглоточные смывы/аспират, взятые медицинским работником.
Отхаркиваемую мокроту следует собирать у пациентов с кашлем; способствовать продукции мокроты не рекомендуется. У интубированных пациентов следует собирать аспират из нижних дыхательных путей или бронхоальвеолярный лаваж.
Данные, сравнивающие точность исследования на разных участках ограничены, но предполагается, что чувствительность теста может варьироваться в зависимости от типа образца. В образцах из нижних дыхательных путей может наблюдаться высокая вирусная нагрузка, и с большей вероятностью определяется положительный результат, чем в образцах с верхних дыхательных путей. Интерпретация
Положительный тест на SARS-CoV-2 в целом подтверждает диагноз COVID-19. Однако в литературе хорошо описаны ложноотрицательные тесты образцов из верхних дыхательных путей. Если первоначальное тестирование является отрицательным, но подозрение на COVID-19 сохраняется, предлагается повторить тест, т. к.
верификация инфекции важна для определения тактики ведения и осуществления профилактических мер. В таких случаях ВОЗ также рекомендует тестирование образцов из нижних дыхательных путей, если это возможно.
Применение мер предосторожности в борьбе с COVID-19 должно продолжаться, пока проводится повторная оценка.
Во многих случаях из-за ограниченной доступности тестирования и озабоченности по поводу ложноотрицательных результатов диагноз COVID-19 предполагается на основе клинической картины в условиях возможного контакта (проживание или поездка в регион неблагоприятный по распространению инфекции) или при известном контакте.
В таких случаях, особенно у госпитализированных пациентов с отрицательными тестами на РНК SARS-CoV-2, характерные лабораторные данные или результаты визуализирующих методов диагностики могут дополнительно подтвердить клинический диагноз COVID-19 и стать причиной применения профилактических мер.
Тем не менее, другие потенциальные причины симптомов также должны быть исключены в случаях отрицательных тестов на РНК SARS-CoV-2.
Интерпретация сомнительного или неопределенного результата зависит от конкретного анализа ОТ-ПЦР. Практикующий врач должен согласовать с лабораторией дальнейшее исследование.
Вероятность положительной ОТ-ПЦР в пробах из верхних дыхательных путей может быть выше в начале заболевания. Точность теста в зависимости от типа образца.
Серологические тесты для выявления первичной инфекции
Серологические тесты направлены на выявление антител к SARS-CoV-2 в крови. Те антитела, которые были адекватно верифицированы, могут помочь выявить пациентов с перенесенным COVID-19.
Серологические тесты могут также позволить выявить некоторых пациентов с текущей инфекцией (особенно на поздней стадии заболевания), но они менее склонны вступать в реакцию в первую неделю заражения и, следовательно, могут быть менее полезными для диагностики острой стадии заболевания.
- Точность и время обнаружения антител варьирует в зависимости от конкретно используемого теста.
- Масштабный серологический скрининг при помощи подтвержденных тестов может дать лучшее представление о распространенности заболевания (путем выявления людей, диагноз которых не был установлен при помощи ПЦР, или тех, кто перенес бессимптомную или субклиническую формы инфекции), а также выявить лиц, имеющих иммунитет к инфекции.
- Другие тесты
- Тесты идентифицирующие антиген SARS-CoV-2, находятся на стадии разработки, хотя экспресс-тесты на выявление антигенов респираторных патогенов обычно менее чувствительны по сравнению с выявлением нуклеиновых кислот вируса с помощью ПЦР Несколько производителей продают экспресс-тесты на выявление антигенов или антител для проведения обследований на местах оказания медицинской помощи, но ВОЗ не рекомендует их из-за проблем с точностью и отсутствия исследований, подтверждающих их надежность.
вопрос 3 — микробиология экзамен
1. Методы исследования микроорганизмов: микроскопические,
микробиологические, биологические, серологические и иммуно-химические,
молекулярно-биологические.
- Методы медицинской микробиологии
- ·
Микроскопические (препараты для прижизненного
исследования м/о и фиксированные препараты). - ·
Микробиологические (выделение м/о в чистой культуре
и изучение физиолого-биохимических особенностей). - ·
Серологические (выявление антигенов м/о и антител в
сыворотке крови). - ·
Биологические (заражение лабораторных животных и
изучение инфекционного процесса) - Микроскопические методы исследования м/о
- С использованием светового микроскопа
- (предел разрешения 0,12мкм)
- ·
Светлопольная микроскопия - ·
Темнопольная микроскопия (до 0,01мкм) - ·
Фазово-контрастная микроскопия - ·
Люминисцентная микроскопия - С использованием электронного микроскопа
- (предел разрешения до 0,1нм)
Микроскопические методы исследований включают приготовление мазков и
препаратов для микроскопирования.
В большинстве случаев результаты
микроскопических исследований носят ориентировочный характер (например,
определяют отношение возбудителей к окраске), так как многие микроорганизмы
лишены морфологических и тинкториальных особенностей.
Тем не менее микроскопией
материала можно определить некоторые морфологические признаки возбудителей
(наличие ядер, жгутиков, внутриклеточных включений и т.д.), а также установить
факт наличия или отсутствия микроорганизмов в присланных образцах.
Микробиологические методы исследований — «золотой стандарт»
микробиологической диагностики, так как результаты микробиологических
исследований позволяют точно установить факт наличия возбудителя в исследуемом
материале.
Идентификацию чистых культур (до вида микроорганизма) проводят с
учётом морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических, токсигенных
и антигенных свойств микроорганизма. Большинство исследований включает
определение чувствительности к антимикробным препаратам у выделенного
возбудителя.
Для эпидемиологической оценки роли микроорганизма проводят
внутривидовую идентификацию определением фаговаров, биоваров, резистентваров и
т.д.
Биологические методы исследований направлены на определение наличия
токсинов возбудителя в исследуемом материале и на обнаружение возбудителя
(особенно при незначительном исходном содержании в исследуемом образце).
Методы
включают заражение лабораторных животных исследуемым материалом с последующим выделением
чистой культуры патогена либо установлением факта присутствия микробного
токсина и его природы.
Моделирование экспериментальных инфекций у
чувствительных животных — важный инструмент изучения патогенеза заболевания и
характера взаимодействий внутри системы микроорганизм-макроорганизм. Для
проведения биологических проб используют только здоровых животных определённых
массы тела и возраста.
Инфекционный материал вводят внутрь, в дыхательные пути,
внутрибрюшинно, внутривенно, внутримышечно, внутрикожно и подкожно, в переднюю
камеру глаза, через трепанационное отверстие черепа, субокципитально (в большую
цистерну головного мозга). У животных прижизненно забирают кровь, экссудат из
брюшины, после гибели — кровь, кусочки различных органов, СМЖ, экссудат из
различных полостей.
Серологические методы исследований выявления специфических AT и Аг
возбудителя — важный инструмент в диагностике инфекционных заболеваний. Особую
ценность они имеют в тех случаях, когда выделить возбудитель не представляется
возможным.
При этом необходимо выявить повышение титров AT, в связи с чем
исследуют парные образцы сыворотки, взятые в интервале 10-20 сут (иногда этот
интервал может быть более длительным).
AT обычно появляются в крови на 1-2-ю
неделю заболевания и циркулируют в организме относительно долго, что позволяет
использовать их выявление для ретроспективных эпидемиологических исследований.
Определение классов Ig чётко характеризует этапы инфекционного процесса, а
также может служить косвенным прогностическим критерием.
Особое значение имеют
методы выявления микробных Аг. В значимых количествах они появляются уже на
самых ранних сроках, что делает их идентификацию важным инструментом
экспресс-диагностики инфекционных заболеваний, а количественное их определение
в динамике инфекционного процесса служит критерием эффективности проводимой
антимикробной терапии.
Иммунохимические методы анализа, основанные на специфическом
связывании определяемого соединения соответствующими антителами, вошли в
аналитическую практику и широко используются в различных областях медицины.
Как
правило, к антителу прикрепляется метка, которая обнаруживает себя при
образовании комплекса «антиген — антитело».
В качестве метки может
использоваться фермент, осуществляющий цветную реакцию (иммуноферментный анализ),
или флюоресцентный краситель (иммунофлюоресценция).
Антигеном — веществом, против которого могут быть
получены антитела, могут являться белки, полисахариды, реже — нуклеиновые
кислоты, т. е. довольно крупные молекулы или клетки, на поверхности которых
такие молекулы имеются. Таким образом, иммунохимические методы выявляют не
возбудителя заболевания, а молекулы, сопутствующие ему, следовательно, они
являются непрямыми методами анализа.
Молекулярно-биологические методы диагностики основаны на идентификации ДНК и
РНК, специфичных для данного вида микробов, и включают гибридизацию на основе
ДНК-зондов и диагностику на основе ПЦР.
Загрузка...
